miércoles, 10 de junio de 2015

Práctica LXII 20/05/20

Determinación de un Du

Fundamento:

 El Du es un antígeno D débil que no se pone de manifiesto en las pruebas normales de la determinación del Rh. Por ello hay que sensibilizar los hematíes problema con suero anti-D y posteriormente enfrentarlos a suero de coombs.
Esta prueba es de coombs indirecta.


Material:

- tubos de hemólisis
- centrífuga
- pipetas Pasteur
- gradilla
- baño de agua
- reloj

Reactivos:

- suero anti-D
- suero de coombs
- solución salina fisiológica

Muestra:

- hematíes de sangre problema suspendidos al 5%

Desarrollo:

1º. En un tubo de hemólisis colocamos una gota de suero anti-D y una de suspensión de hematíes
2º. Mezclamos e incubamos a 37º C durante 30 minutos
3º. Lavamos los hematíes 3 veces con solución salina y decantamos completamente en el último lavado
4º. Añadimos una gota de coombs y mezclamos suavemente
5º. Centrifugamos a 1000 rpm durante 1 minuto

Resultados:

Observamos la aparición o no de aglutinación mediante leves golpes en el fondo del tubo.

Si hay aglutinación el resultado es positivo e indica que en la membrana de los hematíes hay antígeno Du y se clasifica la sangre como Rh positivo, por el contrario si no existe aglutinación la sangre se clasifica como Rh negativo.

Ejercicios:

1.) ¿Qué contiene el suero de Coombs?   
     Suero antiglobulina humana de conejo.
2.) ¿Qué se detecta con la prueba directa?
   Evita falsos positivos y se realiza como control negativo.
3.) ¿ Qué podemos detectar con la prueba indirecta?
     La existencia de antígeno Du en la membrana de los hematíes.
4.) ¿Qué buscamos en la sangre del paciente?
   Poner de manifiesto el antígeno Du.

5.) ¿Qué ocurre si el control es positivo?
   No puede, el resultado seria erróneo.

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