Práctica 10. Gota gruesa

Práctica 10. Preparación de gota gruesa. 10/11/2014

1)    Material:

-          Un tubo capilar heparinizado o no heparinizado si la sangre es venosa.

-          Una pipeta Pasteur

-          2 portaobjetos

-          2 cubetas de tinción con sus respectivos cestillos

2)    Reactivos:

-          Metanol

-          Agua destilada

-          Una solución del colorante Giemsa al 3% en agua destilada.

Esto sólo sirve las ocho primeras horas transcurridas desde su preparación.

3)    Muestra:

Sangre capilar o venosa anticoagulada con EDTA.

4)    Fundamento:

Para poder estudiar muestras sanguíneas que puedan contener parásitos palúdicos, se hace un estudio con el microscopio de tales muestras haciendo una preparación en forma de extensión fina y otra de gota gruesa en el mismo porta. Para confirmar que hay paludismo debemos fijarnos a los hematíes infectados y a los parásitos que hay dentro de ellos. En estas preparaciones de gota gruesa observamos que los hematíes están lisados.

5)    Desarrollo:

1º. Sujetar por los bordes un portaobjetos limpio.

2º. Situar una pequeña gota de sangre en el centro del portaobjetos.

3º. Colocar sobre el portaobjetos tres gotas de sangre algo más grandes, a un centímetro de distancia de la gota anterior y a la derecha de la misma.

4º. Realizamos con otra portaobjetos una extensión en capa fina con la gota pequeña.

5º. Con una esquina del segundo portaobjetos, unir las tres gotas grandes de sangre con movimientos rápidos y circulares, hasta extenderlas formando una capa gruesa.

6º. Dejamos secar la preparación, con el portaobjetos en posición horizontal y la protegemos de calor excesivo.

7º. Fijamos únicamente la extensión fina, depositando sobre su superficie 3 gotas de metanol y se deja que éste actúe durante unos segundos.

8º. La gota gruesa debe dejarse secar durante 24horas.

9º. Cuando ha transcurrido ese tiempo, vertemos el colorante Giemsa al 3% en una cubeta de coloración.

10º. Colocamos la preparación en el cestillo de la cubeta de coloración que contiene el colorante.

11º. Sumergimos la preparación en la solución Giemsa durante 30-45 minutos. La preparación debe de estar al abrigo de la luz solar.

12º. Vertemos agua destilada en otra cubeta de coloración.

13º. Aclaramos la preparación en la cubeta que contiene agua destilada, durante algunos segundos.

14º. Extraemos la preparación del cestillo.

15º. Dejamos secar la preparación situándola en posición vertical.

6)     Resultados:

Obtenemos una preparación con una extensión fina al lado de una gota gruesa de sangre. Ambas teñidas de un color azulado. Se observa en el microscopio para ver si existe algún parásito palúdico que puede encontrarse de distintas formas; en el interior de la hematíes o fuera de ellos.

7)    Interpretación:

En mi caso, sólo observé mis eritrocitos con mayor intensidad de color, no hubo patología alguna.