martes, 9 de diciembre de 2014

Práctica 13. Tinción panóptico rápido

Práctica 13. Tinción panóptico rápido. 13/11/2014

1.     Material:

-         Cubetas de Wertheim o simliares
-         Cestillo para portas
-         Frasco lavador

2.     Reactivos:

-          Solución nº 1: Solución alcohólica de triarilmetano
-          Solución nº 2: Solución tamponada de xanteno
-          Solución nº 3: Solución tamponada de tiazina
-          Agua destilada

3.     Muestra:
Una extensión sanguínea preparada recientemente y que se ha dejado secar al aire.

4.     Fundamento:
Ésta tinción es un sistema que aúna la policromía y la calidad que proporcionan los métodos clásicos (Giemsa y Wright) con una gran rapidez de ejecución, unos 15 segundos nada más. En esta tinción a diferencia de las anteriores descritas, el colorante no se debe extender sobre el frotis, sino que es un método de inmersión, donde el frotis se sumerge en la solución colorante durante un tiempo determinado. (1 segundo)

5.     Desarrollo:
1º. En tres cubetas de Wertheim o similares se disponen los colorantes solución nº1, nº2 y nº3.
2º. Colocamos la extensión en el cestillo para portas y lo sumergimos en la cubeta con la solución nº1 durante 1 segundo. Repetimos la inmersión cuatro veces (en total 5 segundos). Dejamos escurrir.
3º. Sumergimos a continuación otras cinco veces, cada una con un segundo de duración, en la cubeta con solución nº2. Dejamos escurrir.
4º. Por último, sumergimos otras cinco veces en la cubeta con la solución nº3. Lavamos con agua destilada y dejamos secar.
6.     Resultado:
Echamos una gota de aceite de inmersión sobre la extensión y observamos con el objetivo de 100x en el microscopio. Las coloraciones obtenidas en esta tinción son similares a la de la tinción de Wright y Giemsa, pero podemos variar la intensidad de la tinción modificando el número de inmersiones en los colorantes nº 2 y nº 3, según las tonalidades de rosas o azules que queramos destacar.

7.     Interpretación:
Hemos obtenido una extensión parecida a las dos anteriores. Hemos logrado observar los eritrocitos con un color más intenso que anteriormente. La práctica ha salido bien, ya que la extensión era ideal para tal tinción y poder observarla bien en el microscopio. Unas células rosadas pero con algo más de intensidad.
http://sp9.fotolog.com/photo/57/22/81/capun/1268780005013_f.jpg

Ejercicios:
1.)  ¿En qué se diferencia este método de las otras tinciones clásicas?
Esta tinción es un método de inmersión, la extensión se sumerge en las cubetas, mientras que en las anteriores tinciones, se debía depositar con una pipeta Pasteur el colorante sobre la extensión.
2.)  ¿Cuántos segundos debe sumergirse el frotis en cada una de las soluciones?
Cinco veces, un segundo cada vez en cada cubeta.
3.)  ¿Cuál crees que es la solución fijadora?
Las cubetas con soluciones nº1, nº 2 y nº 3.

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