Práctica 8. Tinción supravital con azul de metileno

Práctica 8. Tinción supravital con azul de metileno. 7/11/2014

1.     Material:

-          Microscopio óptico

-          Portaobjetos y cubreobjetos

-          Tubos de hemólisis

-          Pipetas Pasteur

-          Laca de uñas

-          Papel parafilm

2.     Reactivos:

-          Azul de metileno

-          Oxalato potásico

-          Agua destilada

3.     Muestra:

Sangre capilar fresca o venosa anticoagulada.

4.     Fundamento:

En esta práctica utilizamos como colorante el azul de metileno. Éste tiñe los núcleos celulares para observar la morfología ácida de la célula ya que el azul de metileno es de carácter básico.

5.     Desarrollo:

1º Preparamos el colorante;

-          Azul de metileno 0.5g

-          Oxalato potásico 1’6g

-          Agua destilada 100ml

2º Depositamos dos gotas de sangre y dos gotas de azul de metileno sobre un portaobjetos y aspiramos la mezcla con una pipeta pasteur y la ponemos en un tubo de hemólisis o se prepara la mezcla directamente en el tubo.

3º Tapamos con parafilm el tubo y dejamos la mezcla en reposo durante 10 minutos.

4º Después de los 10 minutos cogemos con una pipeta pasteur una o dos gotas de la mezcla y la depositamos sobre un portaobjetos.

5º Cubrimos la mezcla con un cubreobjetos.

6º Observamos en el microscopio la preparación resultante con el objetivo de 40x.

6.     Resultado:

Se observa en el microscopio y se hace de manera rápida, ya que las células no permanecen vivas durante mucho tiempo. Se observan los eritrocitos teñidos en comparación con la anterior preparación sin colorante.

7.     Interpretación:

El resultado de la práctica ha salido bien, ya que tenemos un microscopio en buen estado que nos permite ver con facilidad los eritrocitos y otras células si la sangre es fresca. Hemos observado claramente las células teñidas por el colorante azul de metileno, se ve de manera más clara con éste.

Ejercicios:

1.)    ¿En qué se diferencia una tinción vital de una supravital?

Las tinciones vitales se efectúan sobre células que están vivas, mediante la introducción de un colorante en la circulación de un organismo vivo.

2.)    ¿Cuáles son los colorantes vitales más utilizados?

El azul de metileno y verde Jano

3.)    ¿Qué tipo de estructuras tiñe selectivamente el verde Jano?

Las mitocondrias de verde brillante y las paredes celulares de verde

4.)    ¿Cuáles son las ventajas de una tinción supravital?

Porque es una técnica útil para investigar las células de morfología dudosa en las extensiones teñidas. Es de gran utilidad para identificar monocitos.

5.)    ¿Cuáles son los inconvenientes?

Que las células no se mantienen vivas, acaban desapareciendo por la tinción al ser solubles en alcohol.