Determinación cuantitativa del fibrinógeno

Fecha: 09/03/15

* Fundamento:

El tiempo de formación del coágulo es inversamente proporcional a la concentración de fibrinógeno presente en la muestra de plasma.

El fibrinógeno en presencia de un exceso de trombina se transforma en fibrina.

* Material:

- Cubetas de coagulómetro

- Coagulómetro

- Pipeta graduada de 5 ml

- Micropipeta

- 6 tubos de ensayo

* Reactivos:

- Trombina bovina (R1)

- Tampón imidazol (R2)

- Solución caolín (R3)

* Muestra:

- Plasma pobre en plaquetas (PPP).

* Desarrollo:

1º. Se reconstituye R1 con 2 ml de agua destilada

2º. Se prepara una disolución 1/10 de la muestra y R2: 50 microlitros de muestra +450 microlitros tampón imidazol

3º. En 5 tubos de ensayo se introducen las siguientes diluciones de calibrador:

Dilución del calibrador	1/40	1/30	1/20	1/10	1/5
Tampón Imidazol	3.9	2.9	1.9	0.9	0.4
Coagulation CAL	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
Factor	10/40	10/30	10/20	10/10	10/5
Concentración (mg/dL)	59,75	78,87	119,5	239	478

4º. El contenido de los tubos se introduce en 5 cubetas de coagulómetro con varillas 200 uL en cada una y se le añade 20 uL de R3

5º. Atemperar en la placa calefactora del coagulómetro durante 3 minutos

6º. Introducir sucesivamente las cubetas en la celda de medida y añadir 100 uLde R1 para que empiece la coagulación.

* Interpretación:

Esta determinación detecta déficits en los factores de coagulación de la vía común y fallos en la fibrinólisis.

Se realiza una curva con los tiempos de coagulación y las concentraciones para detectar si los tiempos se encuentran en la curva lineal si están fuera indica que tiene un tiempo alargado de coagulación.