Recuento de leucocitos

Fecha: 12/01/15

* Fundamento:

El recuento de leucocitos consiste en la determinación del número de leucocitos presentes en un volumen determinado de sangre.

* Material:

- Pipeta diluidora de Thoma para recuento de glóbulos blancos

- Tubo de goma con boquilla

- Cámara de recuento, con retículo tipo Neubauer mejorado

- Cubreobjetos

- Microscopio

* Reactivos:

- Líquido de dilución Turck compuesto de:

 * 2 ml de ácido acético glacial

 *1 ml de solución acuosa de violeta genciana al 1%

 *100 ml agua destilada

El ácido acético produce lisis en los eritrocitos y el violeta de genciana tiñe el núcleo de los leucocitos para que puedan observarse mejor.

* Muestra:

- Sangre capilar obtenida por punción del pulpejo del dedo o sangre venosa anticoagulada con EDTA.

* Desarrollo:

1º. Situar un cubre sobre el retículo de la cámara de recuento.

2º. Aspirar sangre con la pipeta diluidota hasta la señal de 1 y a continuación limpiar cuidadosamente el exterior de la pipeta para aspirar el líquido diluyente hasta la señal de 101

3º. Desenganchar el tubo de goma de la pipeta y homogeneizar el contenido del bulbo sujetando la pipeta por sus dos extremos y agitando suavemente en sentido horizontal durante 2-3 minutos.

4º. Desechar las 3 primeras gotas emitidas por la pipeta.

5º. Depositar la siguiente gota entre la cámara y el cubre.

6º. Dejar reposar unos minutos y enfocar con el objetivo de 10x o 40x del microscopio y contar los leucocitos que hay presentes en 4 cuadrados grandes de las esquinas del retículo.

* Resultado:

Como se cuentan los leucocitos presentes en 4 cuadrados se divide el resultado entre 4 este resultado se multiplica por 10 ya que el espacio entre los cuadrados grandes y el cubre es de 0,1  mm y multiplicarlo por 10 por que la sangre se diluye con el liquido y se llega al enrase de 1 (factor de dilución)

WBC=L/4x 10x D (10)

* Interpretación:

La disminución del WBC se produce en las leucopenias, su aumento produce leucocitosis.

Un WBC normal esta entre 5000 y 11000 leucocitos/ mm3 de sangre.

Ejercicios:

1.) ¿Cuál es el líquido de dilución utilizado en el WBC?

     Turck

2.) ¿Para qué sirve el violeta de genciana?

     Tiñe el núcleo de los leucocitos

3.) ¿Con qué objetivo se pueden contar los leucocitos?

     Si se ve bien con el de 10x

4.) Si la sangre se diluye a 1/10 y se cuentan 100 leucocitos en 2 cuadrados grandes, ¿cuál es el WBC?

    10000 leucocitos/ mm3