* Fundamento:
La Hb es una proteína que contiene hierro. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles normales, indica anemia que puede obedecer a diferentes causas: anemia primaria, cáncer, embarazo, enfermedades renales o hemorragias.
Si es alto, puede deberse a cardiopatías, deshidratación o estancia en lugares de gran altitud.
* Material:
- Espectofotómetro
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
- Equipamiento habitual de laboratorio.
* Reactivos:
- Cianuro de potasio
- Ferricianuro de potasio
- Dihidrógeno fosfato de potasio
- Hemoglobin CAL
* Muestra:
- Sangre capilar o venosa
* Desarrollo:
1º. Condiciones de ensayo:
- Longitud de onda: 540 nm
- Cubeta: 1 cm paso de luz
- Temperatura: 15-25ºC
2º. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente al agua destilada.
3º. Pipetear:
A) Método MACRO
A) Método MACRO
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Blanco
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Patrón
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Muestra
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RT (mL)
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5.0
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5.0
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5.0
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Calibrador (microlitros)
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--
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20
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--
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Muestra (microlitros)
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--
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--
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20
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B) Método MICRO
4º. Mezclar e incubar 3 minutos a temperatura ambiente (15-25ºC)
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Blanco
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Patrón
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Muestra
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RT (mL)
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2.5
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2.5
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2.5
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Calibrador (microlitros)
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--
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10
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--
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Muestra (microlitros)
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--
|
--
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10
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5º. Leer la absorbancia (A) del calibrador y la muestra, frente al Blanco de reactivo.
6º Hacemos los cálculos con los resultados obtenidos:
(A) Muestra / (A) Patrón x 15 = g/dL de hb
* Resultado:
Hemos obtenido un resultado de hemoglobina que oscila en los niveles normales de ésta.
* Interpretación:
La práctica ha salido como lo esperado, como resultado nos ha dado 14g/dL, algo que está dentro de los parámetros normales en mujeres y hombres.
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