miércoles, 18 de marzo de 2015

Espectofotómetro de hemoglobina.

Fecha: 19/01/2015

* Fundamento:

La Hb es una proteína que contiene hierro. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles normales, indica anemia que puede obedecer a diferentes causas: anemia primaria, cáncer, embarazo, enfermedades renales o hemorragias.
Si es alto, puede deberse a cardiopatías, deshidratación o estancia en lugares de gran altitud.

* Material:

- Espectofotómetro
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
- Equipamiento habitual de laboratorio.

* Reactivos:

- Cianuro de potasio
- Ferricianuro de potasio
- Dihidrógeno fosfato de potasio
- Hemoglobin CAL

* Muestra:

- Sangre capilar o venosa

* Desarrollo:

1º. Condiciones de ensayo:
- Longitud de onda: 540 nm
- Cubeta: 1 cm paso de luz
- Temperatura: 15-25ºC
2º. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente al agua destilada.
3º. Pipetear:
A) Método MACRO


Blanco
Patrón
Muestra
RT (mL)
5.0
5.0
5.0
Calibrador (microlitros)
--

20
--
Muestra (microlitros)
--
--
20

B) Método MICRO


Blanco
Patrón
Muestra
RT (mL)
2.5
2.5
2.5
Calibrador (microlitros)
--

10
--
Muestra (microlitros)
--
--
10


4º. Mezclar e incubar 3 minutos a temperatura ambiente (15-25ºC)
5º. Leer la absorbancia (A) del calibrador y la muestra, frente al Blanco de reactivo.
6º Hacemos los cálculos con los resultados obtenidos:
(A) Muestra / (A) Patrón x 15 = g/dL de hb

* Resultado:

Hemos obtenido un resultado de hemoglobina que oscila en los niveles normales de ésta.

* Interpretación:

La práctica ha salido como lo esperado, como resultado nos ha dado 14g/dL, algo que está dentro de los parámetros normales en mujeres y hombres.

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