Fecha: 04/03/15
* Fundamento:
La
recalcificación del plasma pobre en plaquetas se realiza mediante a adición de
cloruro cálcico
El sustituto
del f3p consiste en la suspensión de fosfolípidos, obtenida a partir de
cerebros de conejos, que recibe el nombre de cefalina. Es el tiempo que tarda en coagular un PPP, tras su recacificación y en presencia de un sustituto de f3p.
* Material:
- Gradilla
- 2 cubetas de coagulómetro
- 2 trocitos de acero para depositar en el interior de las cubetas
- Micropipeta
- Puntas de micropipeta
- Coagulómetro
- Baño de agua a 37º C
- 4 tubos de ensayo de plástico
* Reactivos:
- Solución
CaCl2
- Cefalina
activada con ácido helágico
- Pool de
plasmas normales o plasma control normal
* Muestras:
PPP
correctamente preparado (sangre centrifugada durante 10 minutos a 3000 rpm)
* Desarrollo:
1º. Homogenizar
los reactivos y la muestra.
2º. Depositar
el volumen que se usara de muestra y reactivos en tubos de ensayo.
3º. Atemperar
reactivos y muestra a 37º C durante 5 minutos.
4º. Introducir
trocito de acero en 2 cubetas de coagulometro.
5º. Rotular
las cubetas con las letras M (muestra) y C (control).
6º. Verter 100
uL de muestra en la M
y 100 uL de plasma control en la
C.
7º. Añadir a
ellas 100 uL de cefalina activada
8º. Mezclar
bien y dejar en la placa calefactora del coagulómetro para incubarlas durante 2
minutos.
9º. Colocar
sucesivamente en la celda de medida del coagulómetro las dos cubetas y agregar
100 microlitros de CaCl2 a cada una para que empiece la lectura del
coagulometro.
* Resultado:
El TTPA es el
tiempo transcurrido desde la adición del CaCl2 hasta la formación del coágulo
de fibrina.
Los valores
normales están comprendidos entre 30 y
40 segundos, se considera anormal un TTPA de la muestra superior en más de 8
segundos al del control.
También se
puede expresar en forma de cociente (ratio) que es entre los segundos del
plasma del paciente y el número de segundos
del plasma control normal. Cuanto mayor sea el cociente mayor será el
déficit coagulatorio.
* Interpretación:
El TTPA se
emplea para detectar déficits de los factores de la vía intrínseca de la
coagulación y para el control de los tratamientos con anticoagulantes y las
terapias con heparina.
Ejercicios:
1.) ¿De donde
se obtiene el sustituto de f3p?
Cerebro de los conejos
2.)¿Cómo se
llama el sustituto?
La Cefalina
3.) ¿Qué
activadores de los factores de contacto se pueden utilizar?
Cloruro cálcico.
4.)¿Cuántos
segundos debe superar el TTPA de la muestra al del control para ser considerado
anormal?
8 segundos
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